分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收的特性,以較純的單色光作為入射光,測定物質(zhì)對光的吸收,從而對物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的儀器。選擇分光光度計(jì)所關(guān)注的關(guān)鍵指標(biāo)有三點(diǎn):一是波長范圍,二是波長準(zhǔn)確度,三是雜散光參數(shù)。波長范圍的選擇是由用戶實(shí)驗(yàn)需要所定,波長范圍越寬的價(jià)格越貴;波長準(zhǔn)確度及雜散光參數(shù)的數(shù)值越低,表示性能越好。
1、波長準(zhǔn)確度的檢驗(yàn)
分光光度計(jì)在使用過程中,由于機(jī)械振動(dòng)、溫度變化、燈絲變形、燈座松動(dòng)或更換燈泡等原因,經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實(shí)際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導(dǎo)致儀器靈明度降低,影響測定結(jié)果的精度,需要進(jìn)行檢驗(yàn)。
檢驗(yàn)波長準(zhǔn)確度簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值,如果測出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定,則需要進(jìn)行波長調(diào)節(jié)。
2、透射比正確度的檢驗(yàn)
用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。
3、穩(wěn)定度的檢驗(yàn)
在零點(diǎn)不受光的條件下,用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點(diǎn),觀察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點(diǎn)穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處,調(diào)節(jié)零點(diǎn)后,蓋上樣品室蓋,使光電管受光,調(diào)節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調(diào)至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,為光電流穩(wěn)定性。
4、光的檢驗(yàn)
可見分光計(jì)棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計(jì)在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片,以空氣為參比,測量其透射比值,即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。