分光光度計是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。分光光度法則要求近于真正單色光,其光譜帶寬最大不超過3-5nm,在紫外區(qū)可到1nm以下,來自棱鏡或光柵,具有較高的精度。
1.波長準確度的檢驗:
分光光度計在使用過程中,由于機械振動、溫度變化、燈絲變形、燈座松動或更換燈泡等原因,經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導致儀器靈明度降低,影響測定結(jié)果的精度,需要進行檢驗。
檢驗波長準確度簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值,如果測出的值與濾光片標準值之差超出規(guī)程規(guī)定,則需要進行波長調(diào)節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗:
用透射比標準值分別為10%、20%、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處,以空氣為參比,分別測量各濾光片的透射比,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,測量其透射比。
3.穩(wěn)定度的檢驗:
在零點不受光的條件下,用零點調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點,觀察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處,調(diào)節(jié)零點后,蓋上樣品室蓋(打開光門),使光電管受光,調(diào)節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調(diào)至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗:
可見分光計棱鏡式儀器在420nm處,光柵式儀器在360nm處,紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片,以空氣為參比,測量其透射比值,即為儀器在相應波長下的雜散輻射率。